白藜芦醇早在1924年就被发现, 它是一种天然的抗氧化剂, 可降低血液粘稠度, 抑制血小板凝结和血管舒张,保持血液畅通,可预防癌症的发生及发展, 具有抗动脉粥样硬化和冠心病、缺血性心脏病、高血脂的防治作用, 并具抑制肿瘤的作用, 可用于治疗乳腺癌等疾病。白藜芦醇存在于多种植物体中。白藜芦醇高端制剂产品(包括药品及保健品)近千余种,国际上主要从虎杖中提取生产原料,而虎杖是一种广泛分布于中国的蓼科草本药用植物, 多应用于烫伤治疗。虎杖的根和根茎含有白藜芦醇, 但遭受世界各地对药材资源的抢夺, 虎杖资源会出现萎缩的局面。现已有用葡萄籽和花生衣为原料提取白藜芦醇的新工艺获得成功的报道 。我国学者测定出花生根茎中白藜芦醇含量是花生衣几十倍和葡萄籽几百倍, 而且没有与色素分离技术难关,但以花生根茎为原料进行白藜芦醇开发的研究尚未见报道。花生根茎原本是废弃物,用它提取白藜芦醇可变废为宝, 并且花生根茎中的白藜芦醇含量也相当可观, 将更具有市场竞争力, 可以增加农民收入。
本文首先利用GC/MS和HPLC对合肥地区主要种植品种花生根茎分离测定, 通过选择超声波技术辅助提纯、大孔径树脂吸附除去杂质等精制工艺流程,定量制得白藜芦醇精品;最后根据原料费用、工艺流程成本、白藜芦醇精品市场价格等, 推算出花生根茎白藜芦醇开发的经济价值。
利用GC/MS和HPLC对花生根茎白藜芦醇的检测
实验方法
仪器与药品 Agilent6890 /5973N色/质联用仪、色谱柱HP5 -MS(30m×0.32mm×0.25μm)石英毛细管柱,Agilent1100 HPLC色谱仪、PhenomenexSynerglPolar-RPC18色谱柱(4.6mm×150mm, 4μm), W201B恒温水浴锅,小型粉碎机、氮吹仪、分析天平、回旋震荡器、各种移液管及常用的玻璃仪器。色谱纯乙腈、白藜芦醇标准品购自Sigma公司, 氢氧化钠(优级纯), 乙醇、二氯甲烷、硫酸等试剂为市售分析纯。采集安徽省合肥市长丰县、肥东县、肥西县普遍栽培的优良花生品种豫花3号、鲁花11 号、鲁花9号、皖花2号和庐花8号等的根茎为样品。
白藜芦醇提取方法
花生根茎样品清洗晾干, 粉碎后精确称取50g于烧瓶中, 加入乙醇30mL, 70℃冷凝回流提取1h, 重复提取3次,合并提取液。再加入二氯甲烷,放入回旋震荡器中震荡萃取20 ~ 30min, 分离出萃取液, 放入氮吹仪中浓缩至10mL。进行白藜芦醇成分测定, 每个样品重复3 次取平均值。
白藜芦醇分析方法
(1)HPLC,流动相乙腈:水(26∶74), 流速1.0mL/min, 柱温25℃。
(2)质谱检测器 , EI离子源, 电子量70eV;EI源温度250℃;四极杆温度150℃;扫描范围45 ~ 450amu。GC分析条件:进样口温度:250℃;柱温:70℃(4min)10℃/min270℃(2min);进样量:1.0μL。
结论
(1)废弃的花生根茎中白藜芦醇的含量依次为根>茎>叶;不同品种对花生根茎中白藜芦醇的含量影响较大。
(2)花生根白藜芦醇高纯化精品定量制取实验成功,获得约113mg平均纯度为51.33%白藜芦醇粗品和3.20mg纯度为90.00%白藜芦醇精品。
(3)大孔树脂A-B8对白藜芦醇、原花生素的吸附、分离效果与其它物品比较, 有较大优势, 并具有经济、安全、方便的优点。
(4)花生根中含有白藜芦醇, 并且含量相当可观, 易提纯, 工艺流程简易,工艺设备容易制造。
(5)农户种植花生, 每年每667m2 每收获一次花生,利用废弃的花生根茎生产白藜芦醇, 就可获得至少790元的纯利润。
(6)花生根茎白藜芦醇的开发, 变废为宝, 具有科学价值, 并且拥有广阔的原料市场, 经济利益十分可观, 市场需求量大, 市场竞争力强。