缓释剂的红外光谱图

将胰岛素缓释剂样品进行红外光谱分析，得到红外光谱如图1 所示。由图1 可以看到，缓释剂的红外图谱中没有3360cm － 1处NH2 的伸缩振动峰的存在，说明原药胰岛素在缓释剂中分布较均匀，没有明显聚集区域的出现，缓释剂的红外图谱与空白载体的红外图谱相似，但是吸收峰位置发生迁移，同时由胰岛素的红外图谱与缓释剂的红外图谱比较可知，缓释剂中1225cm － 1和1075 cm － 1 峰增强。胰岛素中1660 cm － 1 和

1551 cm － 1处的吸收峰在缓释剂中迁移至1733 cm － 1和1645 cm － 1 处，2342 cm － 1 和1400 cm － 1 峰没有变化。载体的图谱与纯胰岛素的图谱相比，未出现新的特征峰，推断胰岛素、壳聚糖、海藻酸钠之间未发生化学反应。

通过多次实验，所得缓释剂的红外光谱基本相同，说明制备的胰岛素缓释剂稳定，其中载体的伸缩振动特征峰与标准品的红外特征吸收峰值一致，表明缓释剂中可以分析出胰岛素的成分，说明该复合载体中确实包裹胰岛素。

2． 2 标准曲线的测定

为了选择胰岛素吸收波长，对胰岛素标准溶液进行全波段扫描。胰岛素在400 － 800nm 范围内有较强吸收峰，在620nm 波长处溶液有最大吸收。对于胰岛素最大吸收波长的测定，首先是配制浓度为0． 025mg /mL 的标准溶液，分别移取0． 0mL、0． 3mL、0． 6mL、0． 9mL、1． 2mL、1． 5mL、1． 8mL、2．1mL，再加入对应的去离子水量为2． 1mL、1． 8mL、1．5mL、1． 2mL、0． 9mL、0． 6mL、0． 3mL、0． 0mL，每组溶液中加入配制好的考马斯亮蓝指示剂，充分摇匀，测定吸光度，得到不同浓度胰岛素溶液吸光度曲线，如图3 所示。

得到标准曲线回归方程为A = 0． 35325 + 8． 95714C，Ｒ = 0． 99994式中A 为吸光度，C 为标准溶液中胰岛素的质量浓度( mg /mL) 。结果表明，胰岛素质量浓度在0～ 0． 06mg /mL 范围内线性关系良好。

2． 3 溶出度测定结果

样品胶囊中胰岛素( insuline) 简写为IN。取六组实验所得的载胰岛素的壳聚糖－ 海藻酸钠制剂，将它们制作成胶囊，于溶出度仪上，在人工胃液环境下进行溶出度的实验测定，得到表1 中的数据。从表1 看出: 总体上，反应时间对溶出液中胰岛素的浓度的影响比较大，测试的六组样品都是随着反应时间的增加，胰岛素浓度下降; 但反应时间在前4 个小时内，胰岛素浓度相对稳定地维持在一定范围内，说明缓释剂制剂在被模拟胃液消化时，缓慢释放胰岛素，这也证明了壳聚糖－ 海藻酸钠载体具有良好的缓释效果。当溶出时间达到5h 时，胰岛素浓度明显下降，载体制剂较好的完成了溶出实验，胰岛素被基本消化。从表1 还可以看出，在实验的6 个样品中，3号样品相对较好，制剂量较少，但是释放胰岛素的量相对较稳定。

2． 4 缓释剂制备工艺优化

选取对溶出度有显著影响的壳聚糖与海藻酸钠的质量配比、混合溶液( 担载胰岛素后) 反应时间和加胰岛素量三个主要因素进行单因素试验，结果说明溶出度比较恒定的条件分别是: 壳聚糖与海藻酸钠的配比为1: 2，混合溶液反应时间为30min，加胰岛素量为浓度是1． 0mg /mL 的溶液28mL。在单因素试验结果的基础上，进行正交试验，表头设计见表2。根据表2 样品胶囊中的胰岛素溶出结果，以3号样品缓释剂在溶液中溶出4h 时溶液中胰岛素浓度为考察指标，以壳聚糖与海藻酸钠的质量配比( A) 、加胰岛素量( B) 、混合溶液( 担载胰岛素后) 反应时间( C) 作为考察因素，应用L9( 34 ) 正交表安排实验，实验结果见表3。正交设计实验结果表明: 各因素对缓释剂在模拟人工胃液中溶出4h 时溶液中胰岛素浓度的影响大小顺序为: 壳聚糖与海藻酸钠的质量配比＞ 加胰岛素量＞ 混合溶液( 担载胰岛素后) 反应时间; 壳聚糖与海藻酸钠的质量配比和加胰岛素量对缓释剂的质量影响显著，混合溶液( 担载胰岛素后) 反应时间的影响不显著。缓释剂的最佳制备条件为A2B2C2，即壳聚糖与海藻酸钠的质量配比为1: 2，加胰岛素量为28mL，混合溶液( 担载胰岛素后) 反应时间为30min。采用最佳工艺条件制备的缓释剂在模拟人工胃液中溶出4h 时溶液中胰岛素浓度为26． 6μg /mL。

3 结论

以壳聚糖和海藻酸钠为基本的载体原料，制备了载胰岛素的缓释剂，并进行了药物缓释性能研究。正交设计实验优化的最佳制备工艺条件为: 壳聚糖与海藻酸钠的质量配比为1: 2，加胰岛素量为28mL 浓度为1． 0mg /mL) ，混合溶液( 担载胰岛素后) 反应时间为30min; 采用最佳工艺条件制备的缓释剂在模拟人工胃液中溶出4h 时，溶液中胰岛素浓度为26． 6μg /mL。本实验制备缓释剂过程中，无有毒有害物质加入和释放，不污染环境，制备工艺简单，操作安全，制得的缓释剂具有显著的缓释作用。