研究超声波法对苦菜中氨基酸提取的最佳工艺条件．以单因素方法和正交实验对提取条件进行选择，采用紫外分光光度法测定苦菜中总氨基酸含量，并用ＨＰＬＣ对提取产物进行了表征．结果表明，苦菜中氨基酸的最佳提取工艺条件为：乙醇质量分数６０％，超声功率６０Ｗ，料液比为１ｇ料４０ｍＬ乙醇，提取时间３０ｍｉｎ，提取温度６０℃，此时氨基酸的提取率１．２９％．该方法准确性好，方便快捷，为苦菜的发展提供了一个定量方法和参考依据．

关　键　词：苦菜；超声波；总氨基酸；高效液相色谱；紫外分光光度

苦菜是一种药用食用兼具的无毒野生植物，属菊科．别名天香菜、荼苦荚、甘马菜、老鹳菜、无香菜等，药名叫“败酱草”，异名女郎花、鹿肠马草，民间俗称苦菜．作为食物，其味道独特，营养成分高，含有人体需要的多种维生素、矿物质、糖类等［１］．《内蒙古中草药》记载，苦菜味苦、辛，具清热解毒、排毒、止痛之功效［２］，可用于治疗无名肿痛、乳痈疖肿、阑尾炎、肝炎等各种炎症以及肺热咳嗽、肺结核等［３］．苦菜中含有大量的药用化学成分，主要为三萜、甾醇、倍半萜、黄酮、氨基酸等多种类型．近年来，国内外医药界对苦菜进行了广泛而深入的研究［４－７］，其药理功能有防治贫血、消暑保健清热解毒，杀菌消炎，提高免疫力，抗肿瘤等作用．据报道［８］，苦菜含１７种氨基酸，所含的必需、半必需氨基酸总量及每一种必需氨基酸含量均比普通蔬菜高．氨基酸是蛋白质的基本组成单位，是构成动物营养所需蛋白质的基本物质，是治病的主要成分或辅助成分，它能调节生理机能、供给热能、促进生长发育、补充能量代谢消耗［９］．因此，食用苦菜有助于促进人体内抗体的合成，增强机体免疫力，促进大脑机能．苦菜在我国的分布广泛，野生资源丰富．对于苦菜药用成分的研究大部分集中在东北、西北、华北［１０－１２］．不同地区、不同生产期的药用植物，其药用成分的含量会有明显的差异［１３］．本文就福建省三明产的野生苦菜中总氨基酸的含量进行研究，以为这一资源的充分利用提供技术参数．

氨基酸的提取分析方法有如下几种：化学分析法、电化学方法（包括电导检测、安培检测）、分光光度法（包括可见光分光光度法、紫外分光光度

法和荧光分光光度法）［１４］．此外还有茚三酮比色法，该法简便、快捷，茚三酮衍生显色反应的灵敏度可达２×１０－１０～５×１０－１０　ｍｏｌ／Ｌ，且衍生物稳定性好，因此在实验室中被广泛应用于氨基酸的分析检测．本文采用的氨基酸含量测定方法便是茚三酮比色法．氨基酸自动分析仪分析法准确度、自动化程度和灵敏度高，可对氨基酸进行直接分析，其缺点是仪器价格昂贵、分析时间长、使用范围局限，只能用于分析氨基酸［１５］．高效液相色谱法简便、准确、可靠、灵敏度高、检测限低、检测速度快［１６］，因此该法的应用最广泛．本实验中提取所得的氨基酸便是通过此法来测定其所含的主要成分．毛细管电泳法利用离子在电场力作用下迁移速度的不同对组分进行分离和分析，具有分离效率高、分析速度快、样品用量少、应用范围广、仪器简单、污染小和成本低等优点［１７］．该法是近２０年来发展较快的分析分离技术之一，由于重现性差，且在实验室中的推广应用的程度不及高效液相色谱法，所以目前还未被广泛应用．

１　实　　验

１．１　仪器与试剂

（１）试剂．苦菜（七月中旬）采自福建三明市三元区；Ｌ－ 酪氨酸标准品，中国药品生物制品检定所；无水乙醇、９５％乙醇、石油醚、茚三酮、磷酸二氢钾等均为分析纯；蒸馏水；甲醇、乙腈为色谱纯；异硫氰酸苯酯，化学纯；样品稀释液（取３５５ｍｇ磷酸氢二钠加超纯水至５００ｍＬ，用１０％磷酸乙腈（Ｖ（磷酸）∶Ｖ（乙腈）＝９５∶５）调其ｐＨ 值为７．４）；超纯水．

（２）仪器．ＤＨＧ－９０７０Ａ型电热恒温鼓风干燥箱，上海基玮实验仪器设备有限公司；ＦＡ１６０４Ｎ型电子天平，上海精密科学仪器有限公司；ＳＨＢ２３型循环水式多用真空泵，郑州杜甫仪器厂；１２０目标准筛，浙江上虞市道墟张兴纱筛厂；ＦＡ２２０４Ｂ型电子天平，上海精密科学仪器有限公司；ＳＦ－１３０Ｃ万能粉碎机，吉首市中诚制药机械厂；７２２Ｓ型可见分光光度计，上海精密科学仪器有限公司；ＫＱ－３００ＤＢ超声波清洗器，昆山市超声仪器有限公司；ＵＶ－１１００型紫外可见分光光度计，北京瑞利仪器有限公司；１２００型高效液相色谱仪，美国安捷伦公司．